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技術(shù)支持

緩沖液的選擇與計(jì)算
更新時(shí)間:2018-12-26   點(diǎn)擊次數(shù):1754次
      緩沖液通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中較=較常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。
  緩沖液的選擇與計(jì)算:
  為了保證緩沖液有足夠強(qiáng)的緩沖能力,在配制緩沖液時(shí),需要做到:
  1)為使共軛酸堿對的濃度比接近于1,應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對,使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH,例如,生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖液,則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(pKa(NH4+)=9.25)。可見弱酸的Ka是選擇緩沖液的主要依據(jù)。
  緩沖液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍,例如,苯酚在堿性介質(zhì)及鐵氰化鉀存在下,可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料,為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時(shí)較為適宜。為此,就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖液調(diào)整和控制待測溶液的pH為10.0士0.2。
  在實(shí)際工作中有些分析人員由于不大了解緩沖液的作用機(jī)理,當(dāng)所配制和使用的緩沖液與規(guī)定的數(shù)值不相符時(shí),為使緩沖液達(dá)到要求,就用鹽酸或氫氧化鈉等強(qiáng)酸、強(qiáng)堿進(jìn)行調(diào)節(jié), 以為這樣做可以使緩沖液盡快達(dá)到所需要的pH值,然而,結(jié)果卻適得其反,這樣的溶液pH值雖然調(diào)對了,可是它的緩沖體系卻被破壞了,作用也就失去了,緩沖液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對共軛體。

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